第1篇：发育生物学实验教案
发育生物学实验教案
实验一
模式生物蛙、海胆胚胎发育各阶段切片观察
一、实验目的了解模式生物发育过程中的形态变化。
二、实验原理
在多种动物中，胚胎发育经历受精、桑椹胚、囊胚、原肠时期、神经时期，不同时期具有不同的特点，在发育中其形态和构造经历明显的阶段性变化。
三、试剂与材料 1.实验试剂
香柏油、显微镜 2.实验材料
模式生物切片、装片（蛙、海胆）
四、实验步骤
观察模式生物发育各时期的胚胎形状变化。
五、实验作业
记录形态学变化。
实验二
模式生物鲫鱼、鸡胚胎发育各阶段切片观察
一、实验目的了解模式生物发育过程中的形态变化。
二、实验原理
在多种动物中，胚胎发育经历受精、桑椹胚、囊胚、原肠时期、神经时期，不同时期具有不同的特点，在发育中其形态和构造经历明显的阶段性变化。
三、试剂与材料 1.实验试剂
香柏油、显微镜 2.实验材料
模式生物切片、装片（鲫鱼、鸡）
四、实验步骤
观察模式生物发育各时期的胚胎形状变化。
五、实验作业
记录形态学变化。
实验三
两栖类变态过程的观察
一、实验目的了解两栖类动物变态过程中的形态变化。
二、实验原理
在多种动物中，胚胎发育经历一个幼虫期，幼虫具有与成体非常不同的特点，在发育中其形态和构造经历明显的阶段性变化，其中有一些器官退化消失，有些得到改造，有些新生出来，从而结束幼虫期，建成成体结构，这种现象统称为变态。
三、试剂与材料 1.实验试剂
何尔夫列他溶液（氧化钠0.35g，氯化钾0.005g，二氯化钙0.01g，碳酸氢钠0.02g，蒸馏水100mL）2.实验材料
蛙的蝌蚪
四、实验步骤
人工饲养青蛙，观察其变态过程中的形态变化。
五、实验作业
记录蛙变态过程中的形态学变化。
[附] 蛙的饲养方法
卵和蝌蚪的培养最好用洁净的自来水，并加上稀释5-6倍的何尔夫列他液（氧化钠0.35g，氯化钾0.005g，二氯化钙0.01g，碳酸氢钠0.02g，蒸馏水100mL），这样可以增加胚胎和蝌蚪发育所必需的钠、钙、钾离子。培养水要多而清洁，否则会因缺氧而致死。
蝌蚪主要吃植物性饲料，如水藻等。煮过的菠菜和莴苣是最适宜的食物，但投喂时不宜煮得太熟，并注意除去纤维。初次投食量要小，以后可不断增加。每天定时定量投喂，不宜过多，以防残渣腐败，造成水体污染。若用缸、盆培养，或水体较小，一般3-5d换一次水较好。当蝌蚪发育成带有短尾的幼体开始用肺呼吸时，若用池塘培养，水中必须放些水草，或小木条，以供其登陆用。若为缸、盆培养，水里可放一些泡沫塑料。
成体主要吃昆虫之类的动物性食物，以直翅目、鞘翅目、膜翅目、蜻蜓目为最多，其次为双翅目、脉翅目、半翅目等昆虫。有时也食蛛形动物、蚯蚓，甚至也以谷粒、鱼苗或蝌蚪及小蛙为食。
实验四
鸟类胚胎发育的观察
一、实验目的熟悉鸟类胚胎发育的过程。
二、实验原理
鸟类胚胎发育是典型的体外发育，利用人工孵化的家禽，可以方便观察其发育过程。鸡胚胎发育可分为两个阶段：成蛋阶段和成雏阶段。（1）胚胎在卵形成过程中的发育
即母体内的发育，也即是成蛋阶段的发育。这个阶段的发育过程是，受精卵+卵裂+囊胚期+原肠期。当胚胎发育到原肠期时，已分化形成上胚层和下胚层，从外观上看形如一个圆盘状体即为胚盘，当卵排出体外，因温度下降，胚胎生长发育随即停止。（2）胚胎在孵化过程中的发育
卵排出体外后，保存在18℃以下的环境中，胚胎发育基本处于静止状态。当人孵后，胚胎即开始发育。胚胎在孵化过程中发育的时期称孵化期。鸡的孵化期为21天。
种蛋人孵后，胚胎在原肠期形成的同时，上胚层像个碟状圆盘，在其末端，细胞不断地向中线集中，形成一条细胞带，称原条。原条细胞通过原沟的底部逐渐转人上胚层与下胚层之间，并分别向两侧扩展，这些迁移至上下胚层之间的细胞称为中胚层。原条细胞也逐渐转人上胚层与内胚层之间，并分别向前伸展，伸展的结构称为头突，后发育成脊索。脊索是胚胎期的纵轴支持器官，最终为脊柱所代替，随着胚胎的不断发育，由外、中、内三个胚层逐渐形成各种腺体、器官、骨骼、肌肉、皮肤、羽毛和喙，最后形成新的机体—雏鸡。
三、试剂与材料
鸡的种蛋
四、实验步骤
1.观察比较种蛋（受精）与非种蛋（未受精）内部结构的差异。 2.观看教学片，熟悉鸡的胚胎发育过程。2.人工孵化种蛋，记录鸡的孵化进程及特征。
五、实验作业
拍照记录鸡孵化进程中的特征变化。
[附]
1.鸡胚发育进程及特征
1胚龄：蛋黄表面有一颗颜色稍深，四周稍亮的圆点，俗称“鱼眼珠”或白光珠。2胚龄：可看到卵黄囊血管区，其形状很象樱桃形，故俗称为为“樱桃珠”。3胚龄：卵黄囊血管的形状象静止的蚊子，俗称“蚊虫珠”。卵黄颜色稍深的下部似月牙状，俗称“月牙”。
4胚龄：蛋转动时，卵黄不易跟随着转动，俗称为“钉壳”。5胚龄：明显看到黑色的眼点，谷称“起珠”、“单珠”、“起眼”（若为5天整，还可见到些羊水）。
6胚龄：胚胎形似“电话筒”，一端是头部，另一端为弯增大的躯干部，俗称“双珠”。可以看到羊毛。
7胚龄：白茫茫的羊水增多，胚胎活动尚不强，胚胎在羊水中不易看清，似沉在羊水中，俗称“沉”。正面已布满扩大的卵黄和血管。
8胚龄：胚胎较易看到，象在羊水中浮游一样，俗称“浮”。从背面看，卵黄已扩大到背面，蛋转动时二边卵黄不易晃动，俗称为“边口发硬”。9胚龄：蛋转动时，二边卵黄容易晃动，背面尿囊血管迅速伸展越出卵黄，故俗称为“发边”。10胚龄：尿囊血管继续伸展，在蛋的小头合拢，整个蛋除气室外都布满了血管，俗称为“合拢”、“长足”。
11胚龄：血管开始加粗，血管颜色开始加深，解剖背部出现绒毛，腺胃明显可辨。12胚龄：血管加粗、颜色逐渐加深。解剖身躯覆盖绒毛。
13胚龄：主要观察小头发亮的部分随着胚龄的增长而逐日缩小。头部和身体大部分覆盖绒毛，跖、趾出现角质鳞片原基。
14胚龄：小头发亮的部分随着胚龄增长而逐日缩小，蛋内黑影部分随着胚龄增长而加大，胚胎全身覆盖绒毛，头向气室，胚胎开始改变横着的位置，逐渐与蛋长轴平行。
15胚龄：蛋内黑影部分增大。解剖观察，翅已完全成形，跖、趾的鳞片开始形成，眼脸闭合。体内外的器官大体上部形成了。
16胚龄：黑影继续燕大，解剖冠和肉髯明显，绝大部分蛋自己进入羊膜腔。17胚龄：以小头对准光源，再看不到发亮的部分，俗称“封门”。躯干增大，脚、翅、颈变大、眼、头日益显小，两腿紧抢头部。喙向气室。
18胚龄：气室向一方倾斜，这是胚胎转身的缘故，俗称为“斜口”、“转身”。解剖头弯曲在右翼下，眼开始睁开。
19胚龄：喙进气室，开始呼吸，颈、翅突入气室，头埋右翼下，两腿弯曲朝头部，呈抢头姿势，以便于破壳时挣扎。雏胚开始啄壳，可闻雏鸣叫。照蛋时，可见气室有翅膀、喙、颈部的黑影闪动，俗称“闪毛”。
20胚龄：起初是胚胎喙部穿破壳膜，伸入气室内，称为“起嘴”；接着开始啄壳，称“见嘌”、“啄壳”。
20.5-21胚龄：出壳。 2.鸡的人工孵化
鸡属鸟类，鸟类与哺乳动物胚胎发育不同，受精卵（种蛋）排出母体后完全依赖外界环境条件继续发育。第1-4天为内部器官发育阶段；5-14天为外部器官形成阶段；15-19天为胚胎生长阶段；20-21天为出壳阶段。在整个孵化过程中，温度，湿度，通风换气与翻蛋等外界条件将是保证胚胎正常发育，并使孵化获得成功的关键因素。（1）温度：
温度是孵化过程的首要条件，发育中的鸡胚对温度最敏感，只有在适宜的温度下，才能保证鸡胚的正常生长发育和物质代谢。所以正确地掌握孵化温度是提高孵化率的关键。在1-18天中孵化的最适温度是37.5°C-38.6°C；19-21天则应稍低于此温度是36.1°C-37.5°C。如果温度过高胚胎发育迅速，孵化期缩短，胚胎死亡增加。温度过低则会延长种蛋的孵化时间，同时胚胎发育迟缓并带来死亡。（2）湿度：
水是温度的良导体，空气中的湿度对鸡胚胎发育有很大作用。一般要求1-18天相对湿度40%-60%；19-21天相对湿度65%-75%。若湿度过高会妨碍蛋内水分蒸发，使胚胎发育所产生的大量代谢水不能及时排出，严重时可导致胚胎畸形。若湿度过低，将加速蛋内水分蒸发，造成失水过多，阻碍代谢废物的排出及所需氧气的摄入。易引起胚胎和壳膜粘连。（3）通风换气：
通风换气的主要目的是帮助胚蛋中的胚胎与外界进行气体交换和热能交换，同时调节机内的温度。
胚胎发育过程中需要不断的吸入氧气，排出二氧化碳气和水分。孵化初期，胚胎需要少量氧气可通过酶的作用从蛋黄中获得，而后利用气室的空气，再后则利用尿囊循环与蛋壳上的气孔同外界进行气体交换，19天后胚胎开始用肺呼吸。随着胚龄的增加，胚胎的气体交换量也不断增加。因此除胚胎发育初期外，胚胎的气体交换都是由通风换气解决。
通风换气还与温度、湿度有密切的关系。通风良好时，空气能充分流通还能与外界不断的进行热能交换。温度、相对湿度都可保证。（4）翻蛋：
翻蛋的主要作用是改变胚胎方位，促进羊膜运动，防止胚胎、蛋黄、蛋白与蛋壳之间粘连。胚蛋放置位置必须适当，在1-18天进行定时翻蛋，每2小时翻蛋一次，翻蛋角度以90度为宜。
种蛋孵化到18天时，将种蛋移到出雏盘上叫落盘。这时胚胎发育完成，在20-21天时开始出壳。出壳时胚胎已经完全长成雏鸡。这时雏鸡的头位于气室中（即鸡蛋的大头部分），健壮的雏鸡先把蛋壳啄开一个小孔，然后慢慢的将小孔向两侧扩大，直至破壳到一半以上时，雏鸡的头便可脱壳而出，而后身体也逐渐自行挣脱出来。
1胚龄
2胚龄
3胚龄
4胚龄
5胚龄
6胚龄
7胚龄
8胚龄
9胚龄
10胚龄
11胚龄
12胚龄
13胚龄
14胚龄
15胚龄
16胚龄
17胚龄
18胚龄
19胚龄
20胚龄
20.5胚龄
替补实验
实验五
精子形态观察及体外获能实验
一、实验目的1.熟悉哺乳类精子的形态结构。 2.了解精子体外获能的方法。
二、实验原理
哺乳动物的精子离开精巢后并没有受精能力，必须要经过成熟和获能才能使卵子受精。精子在附睾中成熟。成熟过程中，在附睾中多种物质的作用下，精子质膜的脂类、糖蛋白、唾液酸、吸收抗原、表面ATP酶等许多成分发生变化，负电荷增加，与凝集素的结合力也发生改变。精子射出后，经阴道和子宫到达输卵管，在壶腹部与卵子结合，完成受精。张明觉、Austin 1951年发现兔子和大白鼠直接排出的精子不能使卵受精，必须在生殖道中停留一段时间后才具备受精能力，这一现象称为精子的获能。后来研究发现，精子在体外也能完成获能，卵泡液、输卵管分泌物、血清、房水等多种液体都可使精子获能，pH、Ca2+浓度等环境条件对获能也有影响。精子在获能过程中发生一系列的形态及生理生化的变化，呼吸明显加强，运动形态和速度也发生很大变化，由直线前进变为曲线运动。
体外获能一般分为两步：一是精子的洗涤，经1次或多次离心后除去杂质、死精子、低活力精子、冻精保护液及稀释液等；二是精子的获能处理，主要是使用高离子强度液（His）、钙离子载体、肝素等，以促进钙离子进入精子顶体并刺激精子内部pH升高，从而诱发精子获能。
三、试剂与材料 1.实验试剂
IVF液（NaCl 5.803g/L，KCl 0.201g/L，NaHCO3 2.106g/L，CaCl2·2H2O 0.264g/L，丙酮酸钠0.055g/L，60%乳酸钠3.5mL，葡萄糖1.000g/L，青霉素G钾或钠盐0.063g/L，硫酸链霉素0.050g/L，酚红0.010g/L，Na2HPO4·12H2O 0.056g/L，MgCl2·6H2O 0.102g/L），牛血清白蛋白（BSA）2.实验材料
雄性小鼠
四、实验步骤
1.断颈处死雄性小鼠。
2.打开腹腔，剪取附睾尾（尽可能除去脂肪），将每个附睾尾放入已在37℃、5%CO2培养箱预平衡2h的2ml IVF液（加30mg/ml BSA）中。3.将附睾尾剪成几段，用镊子轻轻挤压之，使精子挤入培养液中，去掉附睾尾。4.吸打均匀后，1800 r/min离心5min，弃上清，以2ml IVF液重悬。5.将精子在37℃、5%CO2培养箱中培养1.5h，使之获能。6.镜检，观察获能精子的运动。
五、实验作业
观察比较精子在获能前后运动形态和速度的变化。
实验六
植物组织培养
一、实验目的了解植物细胞全能性。
二、实验原理
生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质，都有发育成完整个体所必需的全部基因。
三、试剂与材料 1.实验试剂
MS培养基、无菌水，升汞、酒精、次氯酸 2.实验材料
银杏枝叶
四、实验步骤
（一)培养基的配制 1.母液配制 母液分大量元素、微量元素、铁盐及有机物质四 类。2.培养基的配制与分装 3.培养基的灭菌
(二)取材、消毒与接种（1）先将剪下的枝条清洗干净，选择新鲜的花柄、嫩梢和带腋芽的茎段作为外植体，将外植体放在自来水下冲洗12h,以冲洗掉大的土壤颗粒。
（2）将清洗干净的外植体移入无菌操作台进行消毒，先用75%酒精表面消毒30S，再用0.1%新洁尔灭处理15min。消毒后用无菌水冲洗4~5次。
（3）将消毒后的外植体放入消毒过的培养皿上，在无菌条件下切成0.4~0.5 cm长的小段单芽，用无菌滤纸吸干水，立即接种到加有不同激素浓度的MS培养基上，每个培养基接种三个芽，并用封口膜封好。(三)外植体的培养
接种后的外植体放入用75%酒精消毒后的干净的光照培养箱中，培养条件为：温度27℃，光照周期为光照12h/d+黑暗12h/d，培养基的pH值为5.8，进行培养与愈伤组织的诱导。
全部接种工作都是在严格无菌条件下进行的 , 所以要特别认真、仔细、以防杂菌污染。
(四)两周后观察愈伤组织的诱导并进行生根生芽诱导
五、实验作业
1.观察植物组织培养的培养物在培养中的生长情况。
2．观察植物组织培养的培养物有无污染，分析原因？
3.以MS为例，试说明MS培养基中各成分各有何作用。
实验七
植物生长调节剂对果实发育的影响
一、实验目的1.了解2,4-D、萘乙酸对无籽果实形成的诱导作用。 2.了解乙烯对果实的催熟作用。
二、实验原理
植物生长调节剂2,4-D、萘乙酸（NAA）等，在适当的浓度下能诱导无籽果实形成。适当浓度的乙烯利能促进果实成熟。
三、试剂与材料 1.实验试剂
20mg/L2,4-D（用少许1 mmol/L NaOH溶解2,4-D，再用蒸馏水定容），500mg/L NAA（用热水或少量95%乙醇溶解NAA，再用蒸馏水定容），40%乙烯利 2.实验材料
盆栽番茄、辣椒幼苗，香蕉（或大蕉、柿子、芒果等）
四、实验步骤
1.无籽果实的诱导形成 （1）2,4-D诱导无籽果实
在番茄开花授粉前用2-3滴20mg/L 2,4-D溶液涂在花上，以水处理作对照。果实成熟时，观察果实内籽粒的有无。（2）NAA诱导无籽果实
在辣椒开花初期，用2-3滴500mg/L NAA溶液滴在花朵上（或喷花），以水处理作对照。果实成熟时，检查是否有籽。2.乙烯利对果实的催熟作用
将采收后的香蕉（或大蕉、柿子、芒果等）用500mg/L乙烯利溶液浸泡5s，以蒸馏水浸泡作对照，取出果实分别放在箩筐或纸箱内，室温保存。5-10d之内，观察结果。比较果皮的颜色和果实的成熟度
五、注意事项
1.用植物生长调节剂处理材料的时期一定要把握好。
2.可尝试使用不同的激素浓度，筛选出激素的最适作用浓度。
六、实验作业
拍照记录实验结果（包括对照）并进行分析。
第2篇：1普通生物学实验教案
实验一：线粒体和液泡系的超活染色与观察
【课前预习】
1．什么是液泡系？
2．为什么不能用一种活体染料同时观察多种细胞器？
【目的要求】
1.观察动植物活细胞内线粒体、液泡系的形态、发育和分布 2.了解细胞和细胞器的超活染色技术
【基本原理】
线粒体是细胞内一种重要细胞器，细胞的各项活动所需要的能量，主要是通过线粒体呼吸作用来提供的。活体染色是应用无毒或毒性较小的染色剂真实地显示活细胞内某些结构而又很少影响细胞生命活动的一种染色方法。詹纳斯绿 B（Janus green B）是线粒体的专一性活细胞染色剂，毒性很小，属于碱性染料，解离后带正电，由电性吸引堆积在线粒体膜上。线粒体中细胞色素氧化酶使染料保持氧化状态呈蓝绿色，从而使线粒体显色，而在周围的细胞质中染料被还原，成为无色状态。细胞中的线粒体呈蓝绿色的颗粒。
中性红对液泡系的染色具有专一性，将活细胞中的液泡系染成红色。
【实验用品】
1.器材：显微镜、恒温水浴锅、剪刀、镊子、解剖刀、载玻片、盖玻片、吸管、牙签、吸水纸
2.试剂：Ringer 液、1/5000 詹纳斯绿B、1/3000 中性红
3.材料：人口腔上皮细胞、洋葱鳞茎内表皮细胞、小麦（或绿豆）幼根根尖
【方法步骤】
1．线粒体的超活染色与观察
1）口腔上皮细胞线粒体的超活染色：1/5000 詹纳斯绿B1-2 滴，口腔上皮细胞（牙签刮取），载玻片于37℃恒温染色10-15min，显微镜下观察。
2）洋葱鳞茎内表皮细胞线粒体的超活染色与观察：1/5000 詹纳斯绿B 溶液1-2 滴，洋葱鳞茎内表皮，载玻片于37℃恒温水浴染色10-15min，显微镜下观察。2．小麦（或绿豆）幼根根尖液泡系的中性红染色观察
小麦（或绿豆）幼苗根尖（1-2cm）纵切面切片，1/3000 中性红溶液1 滴染色5-10min，载玻片于37℃恒温水浴，盖上盖玻片压扁根尖，显微镜下观察。【实验结果】
口腔上皮细胞的线粒体分布 洋葱内表皮细胞线粒体分布 植物根尖液泡的中性红染色
【实验报告】
1．绘出人口腔上皮细胞示线粒体的形态与分布并简要分析。2．绘出绿豆幼根根尖组织液泡系的形态与分布并简要分析。
实验二 人类细胞中巴氏小体的观察
【课前预习】
什么叫巴氏小体? 【目的要求】
1．了解X染色体失活假设及剂量补偿效应的机制； 2．学习人类性染色质的检查方法。
【基本原理】
巴氏小体(Barr小体)又称X小体：M.l.Barr 等首先发现雌猫的神经细胞间期核中有一个深染的小体，而雄猫没有，故称巴氏小体；由于这个小体与性别及X染色体数目有关，故称X小体（X染色质）。正常女性的两条X染色体在间期一条保持代谢活性，与常染色体一起进行正常活动，另一条DNA复制较晚，呈异固缩状态，没活性，形成X染色质。该失活的染色体在形态学上呈异染色体（即DNA螺旋压的很紧），染色深而致密，呈现三角或椭圆形小体，紧贴核膜内缘，大小约1～1.5 µm，数量为x染色体数减一（特例XXY,XXX核型）。
失活的染色体是随机的，失活状态使得雌性个体两个染色质所携带的两份基因的遗传效应与雄性个体一个X染色体所具有的一份基因的遗传效应基本相当，达到一种剂量补偿效应，是维持雌雄两性生物基因表达一致所特有的遗传效应。
【实验用品】
1．材料：口腔粘膜细胞 2．器材和仪器：显微镜;3．试剂：固定液（甲醇:冰醋酸＝3:1）;改良的苯酚品红（或1%硫堇）染液等。
【方法步骤】 1.取材
口腔粘膜细胞：受检者清水漱口数次，用洁净牙签从女性口腔两侧刮取粘膜，原位刮2～3次，第一次舍去，第2，3次分别涂于干净载玻片上，将刮取物在载玻片上涂片，晾干。
2.固定
将制片置于新配置的甲醇:冰醋酸固定液（3:1）中20min；往载玻片依次滴加95％，70％，50％乙醇及蒸馏水，每次2－3 min；滴加5mol/l盐酸水解约5s；蒸馏水（缓水流）漂洗2－3次，每次10－15 s。
3.染色、制片
在染色缸中染色10～20min（勿干），细水洗去染液，晾干即可镜检。
4.镜检（油镜观察）观察与计数
（1）形态
（2）计数：选择核较大，核质颗粒少，染色均匀清晰、核膜完整的细胞核进行计数，每份标本至少计数50个细胞中X染色质出现得概率。临床指标：正常值男性为0～3%，女性为20%以上。
【实验结果】
【注意事项】 漱口要干净，在镜检前要洗净载玻片、盖玻片以及显微镜镜头。
【实验报告】
1．绘制巴氏小体的形态。2．统计巴氏小体出现的概率。
实验三 减数分裂染色体行为的分析
【课前预习】
1．减数分裂各时期的形态学特点是什么？
【目的要求】
1 熟悉减数分裂各时期的形态学特点，加深对减数分裂遗传学意义的认识;2 学习减数分裂制片方法,了解动植物生殖细胞的形成过程。
【基本原理】
（一）减数分裂是一种特殊的有丝分裂形式,仅发生在有性生殖细胞(如配子:雌配子和雄配子, 卵细胞和精子)形成过程中的某个阶段.（二）减数分裂的特点: 1 连续进行两次核分裂, 染色体只复制一次, 结果形成4个核, 每个核只含有单倍体的染色体, 即染色体数目减半;2 前期特别长, 而且变化复杂, 包括同源染色体的配对, 交换, 分离等.（三）减数分裂的过程: 减数分裂I：同源染色体分离
前期I: 持续时间较长
细线期: 染色体呈细的染色线,其上分布很多染色粒,形似念珠;
偶线期: 同源染色体开始配对, 不易与细线期绝对分开
粗线期: 同源染色体完成配对,染色体明显缩短变粗，双线期: 配对的同源染色体开始分离,染色体图像呈现纽花状
终变期: 染色体缩的更短,呈V, O, 8和X形状，均匀分散，利于计数
中期I 各个二阶体（四分体）排列在赤道面上
后期I 同源染色体分开，移向两极
末期I 移动到两极的染色体解旋恢复到染色质状态 减数分裂II：姐妹染色体分离
(同有丝分裂)中间期： 时间短，因物种而异 前期II：时间短，同末期I 中期II：染色体排列在赤道面上
后期II：姐妹染色体分离并移向两极
末期II：移动到两极的染色体解旋恢复到染色质状态
（四）植物花粉减数分裂
植物花粉形成过程中，花药中某些细胞分化成小孢子母细胞(2n)，每个小孢子母细胞(2n)减数分裂后，产生4个小孢子（单核花粉，n，单倍体）
【实验用品】
1．材料：蚕豆花蕾(2n=12)2．器材和仪器：显微镜、镊子、解剖针、刀片、载玻片、盖玻片、量筒、滴瓶、切片架、切片盒、15cm培养皿、小培养皿、广口瓶、吸水纸。
3．试剂：甲醇、冰醋酸、95%乙醇、无水乙醇、树胶、改良苯酚品红染色液。
【方法步骤】
（一）取材固定 取材的时间及材料大小必须十分恰当，才能获得更多的花粉母细胞分裂相，以供观察。
蚕豆现蕾后，于上午7～9时摘取茎顶幼小花序，将周围小叶和苞叶去掉，留长约1mm 左右的花苞，放入内装有卡诺氏固定液的广口瓶中，固定3～24小时，转入70%酒精中置冰箱内保存。(二)制片观察。
1 剥开已固定好的花蕾取出花药，放于载玻片上；
2 在花药上加一滴改良的苯酚品红染色液，染色10min，边染色边用解剖针剥开花药； 3 加上盖玻片，再把片子放在粗滤纸下，用拇指适力压下，使材料分开，并把周围的染色液吸干；
4 放在显微镜下油镜观察
调节光亮度→低倍镜(10×10)观察（粗调，细调）→高倍镜(40×10)观察→油镜观察：在高倍镜下找到清晰的图像（确定视野），提升聚光镜，在标本中央滴一滴香柏油，使油镜（100×10）镜头浸入到香柏油中，细调至看到清晰图像为止。
用后复原：观察完毕，上悬镜筒，先用擦镜纸擦去镜头上的油，然后沾取少量的二甲苯镜头上的残留的油，最后用擦镜纸擦去镜头上的二甲苯，后将镜体复原。
【实验结果】
1．绘制终变期、中期I、中期II、后期I、后期II细胞图像。【注意事项】
1．怎样区分各个时期？如中I、中I I，后I I、后I ？
【实验报告】
1． 绘制终变期、中期I、中期II、后期I、后期II细胞图像。2． 减数分裂的细胞与有丝分裂的细胞有何不同？
第3篇：实验生物学试题
2008《实验生物学》期中考试试题
请从下列试题中选择5道题进行回答。并写上主讲教师的名字。多答无效。
1.钟杨
从某个新近测序的基因组中发现了一个候选基因，需要进一步预测其功能并鉴定其是否为某个基因家族的成员。试用框图给出相关的生物信息学方法及步骤。
2.王纲
1.在荧光定量PC实验中，如何才能做到绝对定量？
2.对于绝对定量的real timePCR，有必要设内参吗？
3.简述几种实验方法来确定一个作为内参的基因不会因为你的实验条件所改变。
3.廖侃
蛋白质A是细胞内的一个信号分子，可以结合酪氨酸磷酸化蛋白质，它有三个结构域：一个结合酪氨酸磷酸化蛋白质结构域、一个磷酸化位点结构域和一个结合蛋白质B的结构域，并且能独立表达出有功能的结构域。蛋白质A本身可以被受体酪氨酸激酶磷酸化，磷酸化的蛋白质A与蛋白质B的结合能力下降。蛋白质B也能被酪氨酸磷酸化，但其只有在A存在时才磷酸化，而A本身在任何时候都不具有激酶活性。磷酸化位点都为已知。根据以上条件提出蛋白质间相互作用以及被磷酸化调控的模型。模型不得自己增加条件，并且必须符合以上所有条件。根据你的模型设计实验并加以证明。
要求：
1、不包括蛋白质单分子技术类的方法。
2、每一个证明实验必须用两种或两种以上的不同方法加以证明（如分子筛、超离心、SDS电泳为三种不同的测量分子量的方法）。
3、模型用示意图表示并附文字说明。
4.肖华胜
请简述基因芯片的原理及在系统生物学中的应用，并设计一个用基因芯片研究肿瘤分子分型的实验方案。
5.罗振革
设计实验分析蛋白 A对蛋白B在细胞内定位的影响。
6.肖保国
简述流式细胞仪和显微镜检查的区别，双染时荧光素选择的原则，细胞表面染色和胞浆染色的不同之处和具体操作时应该注意的事项。
7.费检
在进行小鼠基因剔除实验中，常用129小鼠的ES细胞和C57小鼠的囊胚，请说明有什么好处和缺点？
